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Title: Etude de la dynamique et phylogénétique des populations bactériennes psychrotrophes du lait cru récolté dans la région de Mila
Authors: khadidja, Bouchair
Keywords: lait cru de vache, réfrigération, paramètres de croissance microbienne, populations bactériennes psychrotrophes, phylogénie, durée de conservation
raw cow milk, refrigeration, microbial growth parameters, psychrotrophic bacterial populations, Phylogeny, shelf-life
Issue Date: Nov-2021
Publisher: university center of abdalhafid boussouf - MILA
Citation: Spécialité: Biodiversité et Valorisation des Ressource Naturelles
Abstract: Afin d'évaluer les changements dynamiques du consortium microbien du lait cru de vache pendant la éfrigération, explorer la diversité des bactéries psychrotrophes et déterminer les relations évolutives entre les taxons sur la base du gène ARNr16S, des échantillons de lait cru ont été collectés dans deux fermes laitières situées dans le bassin et une montagne de la région de Mila en Algérie. Le stockage à froid des échantillons de lait à 4 °C a été utilisé pour promouvoir la croissance microbienne des psychrotrophes pendant 10 jours. La flore microbienne du lait a été cultivée par les méthodes de culture dépendante et l'identification des isolats bactériens a été conduite par les méthodes phénotypiques à la base des critères culturaux, morphologiques et biochimiques ; de plus quelques isolats bactériens ont fait l’objet d’une identification moléculaire par séquençage partiel du gène ARNr16S. Les variations du nombre total viable et les paramètres cinétiques de la croissance microbienne ont été analysées durant la réfrigération à l'aide du modèle Baranyi et Roberts. Les comptes microbiens initiaux dans les échantillons de lait cru prélevés dans les deux fermes (bassin et montagne) était de 3,87 ± 0,11 à 2,94 ± 0,04 log UFC. mL-1 respectivement, et la croissance maximale ne dépassait pas 7,00 ± 0,12 log UCF. mL-1. La limite d'hygiène a été dépassée après 2 jours dans la ferme du bassin et plus tard après 6 jours dans la ferme de montagne. Le temps de génération variait de 1,20 ± 0,55 à 4,18 ± 0,22 jours dans la ferme du bassin et la ferme de montagne respectivement. Le retard notable en croissance microbienne dans le lait de la ferme de montagne par rapport à celui du bassin pourrait être lié au mode d'alimentation intérieur / extérieur adopté en montagne opposé à l'alimentation à l’intérieur seule dans la ferme du bassin. Cette durée de conservation prolongée suggère à la fois la présence de molécules bioactives antimicrobiennes issues des plantes pâturées par les vaches à l'extérieur de la ferme de montagne et à la sélection géographique de microorganismes à potentiel antagoniste évoluant dans la microflore du lait. Les populations bactériennes psychrotrophiques ont été identifiées comme Acinetobacter, Pseudomonas, Aeromonas, Chryseobacterium, Enterococcus et Lactobacillus. Enterococcus constitue le plus grand groupe composé de 9 taxons, avec E. faecalis étant l’espèce prédominante. L'analyse de la génomique comparative sur la base des séquences du gène ARNr16S des souches E. faecalis isolées avec ceux de différentes géographies et climats dans le monde a été menée. Les observations des variations génétiques ont montré que sept souches E. faecalis (MH569850, MH569851, MH569856, MH569856, MH569857, MH569859 et MH569860) ont enregistré des similitudes de séquences inférieures à 97%, ce qui conduit à l'hypothèse que les isolats pourraient représenter une nouvelle espèce du genre Enterococcus
Description: In order to evaluate the consortium microbial dynamic changes of raw cow's milk during refrigeration, explore the diversity of psychrotrophic bacteria and determining the evolutionary relationships between taxa on the basis of the 16S rRNA gene, raw milk samples were collected in two dairy farms situated in basin and mountain areas in the region of Mila, Algeria. Cold storage of milk samples at 4 °C was used to promote psychrotrophic microbial growth during 10 days. The microbial flora of milk was determined by culture methods and the identification of bacterial isolates was carried using cultural, morphological and biochemical criteria. In addition some bacterial isolates have been the subject of a molecular identification by partial sequencing of the 16S rRNA gene. The variations in total viable count and kinetic parameters of microbial growth were analyzed during refrigeration using Baranyi and Roberts Model. The initial microbial counts ranged from 2.94 ±0.04 to 3.87 ±0.11 log CFU * mL-1 and the maximum growth did not exceed 7.00 ±0.12 log CFU * mL-1. The hygienic limit was surpassed after 2 days in the basin farm and later after 6 days in mountain farm. The generation time varied from 1.20 ±0.55 to 4.18 ±0.22 days in the basin farm and mountain farm respectively. The notable delay in microbial growth in milk from the mountain farm compared to the one from basin could be related to indoor/outdoor feeding mode adopted in mountain opposed to indoor feeding in the basin farm. This prolonged shelf-life suggests the possible presence of antimicrobial molecules coming from plants grazed around the farm and the selection in the microbiota of some microbial species with antagonist potential. The psychrotrophic bacterial populations were identified as Acinetobacter, Pseudomonas, Aeromonas, Chryseobacterium, Enterococcus and Lactobacillus. Enterococcus constitutes the largest cluster composed of 9 taxa, with E. faecalis being the predominant species. The comparative genomic analysis on the basis of 16S rRNA gene sequence of E. faecalis isolates with related strains from different geographies and climates was performed. The observations of the genetic variations showed that seven E. faecalis strains (MH569850, MH569851, MH569854, MH569856, MH569857, MH569859 and MH569860) registered similarities of sequences less than 97%, which lead to the hypothesis that the isolates could represent a novel species of the genus Enterococcus.
URI: http://dspace.centre-univ-mila.dz/jspui/handle/123456789/1349
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